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　　1、CST抗體是否適用于全組織樣本裂解物?

　　答：CST 并未測(cè)試所有抗體是否適用于全組織樣本裂解物，但是 CST 的很多抗體已經(jīng)被其他客戶用于整個(gè)組織而且取得成功。

　　2、CST抗體可用于免疫組化嗎 ?

　　答：檢測(cè)抗體是否可用于福爾馬林固定石蠟包埋樣本，是CST 的一項(xiàng)常規(guī)檢測(cè)。那些通過(guò)嚴(yán)格驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)的抗體才會(huì)被推薦用作 IHC-P。我們也在新鮮冰凍組織樣本上檢測(cè)抗體，那些染色成功的才會(huì)被推薦用作 IHC-F。那些推薦應(yīng)用里面沒(méi)有列出 IHC-P 或者 IHC-F 的，可能已經(jīng)失敗，或者沒(méi)有被檢測(cè)，或者我們沒(méi)有用作檢測(cè)的特別的組織樣本。建議你 CST，我們可能有該抗體在其它系統(tǒng)表現(xiàn)良好的數(shù)據(jù)。或者，我們可能有適用于組織染色的更好的其它產(chǎn)品。

　　3、假如說(shuō)明書(shū)上某個(gè)種屬未被列出與 CST抗體有交叉反應(yīng)，是否意味著這個(gè)種屬未被檢測(cè)過(guò)呢?

　　答：如果可能的話，CST 科學(xué)家檢測(cè)所有 CST 抗體在人、小鼠和大鼠的交叉反應(yīng)性。假如我們沒(méi)有獲得某個(gè)種屬的陽(yáng)性結(jié)果，我們就不會(huì)列出這個(gè)種屬。然而，有可能我們檢測(cè)的這個(gè)細(xì)胞系包含一個(gè)低水平的特定蛋白，或者，我們使用的操作對(duì)于那個(gè)特定的細(xì)胞系不起作用。因此,我們建議你比較所研究種屬和 CST 抗體驗(yàn)證種屬修飾位點(diǎn)附近的肽段序列 ( 每邊 5 個(gè)氨基酸 )。在很多情況下，CST 抗體由免疫人的蛋白序列產(chǎn)生，并通過(guò)親和層析高度純化。很多時(shí)候，如果序列相同，或者在非磷酸化位點(diǎn)只有 1 或者 2 個(gè)氨基酸的不同時(shí)，CST 抗體很有可能識(shí)別你的蛋白。但是，我們不能保證其實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

　　4、使用 CST抗體時(shí)，為什么我不能使用我自己實(shí)驗(yàn)室的 Western blot 操作流程?

　　答：CST抗體經(jīng)過(guò)優(yōu)化以提供zui強(qiáng)的信號(hào)、zui少的背景，使用 CST 推薦的Western blot 操作流程，對(duì)于終端客戶的優(yōu)點(diǎn)是節(jié)約時(shí)間和材料。

　　5、為什么CST抗體用于 Western blot 效果不佳?

　　答：這里有幾個(gè)關(guān)于 CST Western blot 流程的細(xì)節(jié)，對(duì)于避免丟失信號(hào)或高背景是非常關(guān)鍵的。

　　• 不要過(guò)度清洗膜。應(yīng)在 TBS/0.1% Tween-20 中清洗三次，每次5分鐘。過(guò)度的清洗會(huì)洗掉一抗。推薦的清洗條件已經(jīng)過(guò)優(yōu)化以獲得的信噪比，因此是zui強(qiáng)、zui干凈的結(jié)果。

　　• 不要過(guò)度封閉 ( 例如超過(guò) 1 小時(shí)或者過(guò)夜 )。在一些抗體中發(fā)現(xiàn)，過(guò)度封閉會(huì)減少特異信號(hào)。確保查閱每個(gè)產(chǎn)品的說(shuō)明書(shū)以得到每個(gè)抗體推薦的封閉時(shí)間。

　　• 一般來(lái)說(shuō)，針對(duì)兔多抗或兔單抗，使用抗兔二抗：#7074;針對(duì)鼠單抗，使用抗鼠二抗：#7076。

　　• 確認(rèn)抗體的說(shuō)明書(shū)上交叉反應(yīng)部分有列出你所檢測(cè)的種屬。

　　• 確認(rèn)你的上樣量達(dá)到 20 μg 細(xì)胞裂解液。

　　• 確認(rèn)誘導(dǎo)的細(xì)胞裂解液樣本蛋白已活化。

　　如果您對(duì)于CST抗體還有其他的疑問(wèn)，咨詢，我們竭誠(chéng)為您解答。